水解酶是催化水解反应的一类酶的总称(如胰蛋白酶就是水解多肽链的一种水解酶),也可以说它们是一类特殊的转移酶,用水作为被转移基团的受体。
水解酶是以“(底物)水解酶”这种格式来命名。但是,一般的名称却是“(底物)酶”,例如核酸酶就是一种水解酶分解核酸。

水解酶在EC编号中分类为EC3,并以它分解的键再细分为几个子类:
EC3.1:酯键(酯酶)
EC3.2:糖(糖基酶)
EC3.3:醚键
EC3.4:肽键(肽酶)
EC3.5:C-N键,但不包括肽键
EC3.6:酸酐
EC3.7:C-C键
EC3.8:卤键
EC3.9:P-N键
EC3.10:S-N键
EC3.11:S-P键
EC3.12:S-S键
EC3.13:C-S键
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